2022年11月17日，由中国医学装备协会应用评价分会主办、北京水木济衡生物技术有限公司承办的《体外诊断试剂研发全流程管理培训课》第三期分析性能评价课程正式开课，培训课程持续三天，邀请了多位行业资深专家授课，吸引了上百家企业参加。

       培训的最后一天，设置了讨论环节，多位专家就学员提出的问题进行了详细的解答，现将部分问题及专家回复整理如下。

       本节主要针对参考区间和阳性判断值相关问题。

67、咨询问题

定性胶体金产品，不存在浓度量值，阳性判断值应当如何确认？是否可用最低检测限的研究替代该研究？

专家答复：

阳性判断值（cut-off value）的定义：用于鉴别样品，作为判断特定疾病、状态或被测物存在或不存在的界限的量值。对于定性试验，高于此阈值的结果报告为阳性，而低于此阈值的结果报告为阴性。

检出限（Limit of Detection，LOD）的定义：由给定测量程序得到的测得量值，对于此值，在给定声称物质中存在某成分的误判概率为α时，声称不存在该成分的误判概率为β。

阳性判断值是被测物存在或不存在的界限的量值，属于临床应用层面；而检出限是在一定声称概率下被测物能检测到的量值，是试剂检测能力指标，属于分析性能。

关于定性试剂检出限的研究，参照定性检测体外诊断试剂分析性能评估注册审查指导原则，文件建议采用对已知分析物浓度的样本进行系列稀释后重复检测的方法，确定申报试剂的检出限。在上述重复检测过程中，记录不同稀释度/浓度检出（或阳性）的结果。采用适当的模型（如Probit分析）和分析方法，计算申报试剂在设定概率下的检出限，一般在该检测浓度下应具有95%的阳性检出率。

关于定性试剂阳性判断值的研究，可参照已发布的新型冠状病毒（2019-nCoV）抗体检测试剂注册审查指导原则，文件建议可采用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve, ROC）的分析方式来选择确定合理的阳性判断值；如结果存在灰区（equivocal zone），应明确灰区建立的基础。应重点考察对弱阳性样本的区分能力，研究中应包含有统计学意义的弱阳性样本例数。

参考区间的分组的Z检验的公式中，120是固定的还是与变动的？如果是变动的，是平均入组人群吗？

专家答复：

参考区间分组的Z判断限值公式中，n代表平均样本量，公式中的120，应该属于固定数值，如果是变动数值那么公式中根号下的数值为常数1。具体可参考文献：On dividing reference data into subgroups to produce separate reference ranges（Clinical Chemistry, 01 Feb 1990, 36(2):265-270）。

一般斜率偏倚不超过多少，认为可接受？为什么截距相对较大，不能进行参考区间的转移？截距在什么范围内是可以接受的？

专家答复：

斜率大小的允许范围可以结合被测量临床用途、量值溯源、准确度要求等制定，具有不同溯源性的产品不建议进行参考区间的转移。对于斜率偏倚目前没有明确的标准，不同产品要求可能不尽相同。截距代表两种测量方法测量结果之间存在着固定差值，通过校准或其他方法无法消除或降低，截距大小可以通过对其进行是否具有统计意义的检验判定。

请问参考区间转移时斜率偏倚和截距大小的允许范围怎么设定呢？ 

专家答复：

同69。

参考范围的下限之下对疾病诊断没有意义，是通过高于上限来判断疾病。这种是否可以通过设定cut off值来判断，那这样的话产品是属于定性还是定量产品？ 

专家答复：

通常定量产品做参考区间的研究，定性产品做cut off值研究。本问题举例如下：男性ALT参考区间为（9~50）U/L，低于9 U/L没有实际临床意义，该情况下仍进行参考区间研究而不进行cut off值研究，ALT检测试剂盒属于定量产品。

对于Dixon方法，是否需要对所有测试数据进行离群值分析，还是只对疑似离群数据进行离群值分析？若只对疑似离群值进行分析，可能还存在因人主观判断漏掉的疑似离群值，大家对这一方法的理解是？ 

专家答复：

从离群值检验的技术角度而言，应分别对极值（单侧检验为极大值或极小值，双侧检验为极大值和极小值）数据进行Dixon检验，直到检出非离群值，这样才能客观的检验离群值，避免因人的主观判断而漏掉离群值的可能性。

定性产品阳性判断值的建立也参考“参考区间”的方法，那需要正常人群和异常人群各满足120例吗？ 

专家答复：

定性产品通常采用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve, ROC）的分析方式来选择确定合理的阳性判断值，正常人群和异常人群各占一定比例，目前对于样本例数没有明确的规定，但至少每个人群样本量应具有统计学意义。

       本专家解答仅代表专家个人观点，不代表任何机构，不能替代相关法律法规，仅作参考用。

       未完待续。