2022年11月17日，由中国医学装备协会应用评价分会主办，北京水木济衡生物技术有限公司承办的《体外诊断试剂研发全流程管理培训课》第三期分析性能评价课程正式开课，培训课程持续三天，邀请了多位行业资深专家授课，吸引了上百家企业参加。

培训的最后一天，设置了讨论环节，多位专家就学员提出的问题进行了详细的解答，现将部分问题及专家回复整理如下。

本节主要针对精密度评价。

11、咨询问题：老师讲的精密度建立过程中需要用的3个临床样本和3个质控品，可以只用3个临床样本吗？或者质控品是否可以减少浓度点？

专家答复：精密度确认过程中，对于测量范围确定，不同浓度水平精密度一致或相差不大的测量系统，可以减少样本数量，3个临床样本；但对不同浓度水平精密度相差较大（低水平精密度差一些，高水平精密度好一些）的测量系统，样本数量不建议少，EP05-A3上是至少5个水平；上述2种情况，在进行精密度评价时，均需运行室内质控程序来保证测量系统的准确度和稳定性，质控品可以减少至2个浓度水平（低、高两个水平）。

12、咨询问题：是否需要研究不同型别？

专家答复：在研发初期还不能判断样本的类型是否会影响精密度时，建议进行考察；优先考察临床患者样本，临床患者样本不满足要求时可对其他可替代的产品进行考察。

13、咨询问题：定性产品的精密性研究，选择的3个水平样本（最低检出限水平、阳性水平、阴性），其中阴性满足C50-20%浓度要求、阳性水平样本满足C50+20%浓度要求且高于最低检出限水平。此时，是否可以不再重复做临界值水平的精密性研究（不再分别重复进行40次检测）。

专家答复：参考定性检测体外诊断试剂分析性能评估注册审查指导原则（2022年第36号）中3.2条款：

3.2临界值水平的精密度研究（如适用）

除上述精密度研究外，建议申请人对申报产品的临界值进行确定，并采用该浓度/水平样本进行精密度研究。此处所述临界值水平不同于通过ROC曲线等方法确定的阳性判断值。理想情况下，临界值浓度水平，即为多次重复试验时，50%的结果为阴性，50%的结果为阳性浓度水平，在本文以C50表示。

如果临界值水平可以确定，仍建议对其进行精密度研究（40次重复性检测）。

14、咨询问题：下述精密性研究方案是否可行？3个水平样本（最低检出限水平、中强浓度水平、阴性）使用2个批次试剂，分别进行重复性试验和再现性试验。重复性实验方案：3个水平样本，使用每个批次试剂分别重复2次检测，进行20天，共使用2个批次试剂。（每个水平样本检测数量：2次重复检测× 2批试剂× 20天）再现性实验方案：分别在3个环境下对3个水平样本进行实验，每个批次试剂分别重复5次检测，进行5天，共使用2个批次试剂。（每个水平样本 每个批次试剂检测数量：5次重复检测×3个环境× 5天）。

专家答复：重复性实验中数据分析时建议用1个批次试剂就可以满足研究要求，若要按定量产品中单点精密度来评价的话，用1个批次试剂，增加1个分析批（2次重复检测）。

再现性实验方案中建议增加重复测量次数，即由5次增加到8次（参考精密度评价研究时定性产品的重复测量次数需达到40次及以上），这样每个环境下各水平样本的检测次数也可满足统计要求。

15、咨询问题：除上述精密性实验外，是否还需要再进行中间精密度？

专家答复：上述两种方案的测量条件已经是中间精密度的其中一种（不同天、不同试剂批号、不同环境等），如果发现有其他影响较大的因素则可进行相关的条件改变，进行相关的精密度研究。

16、咨询问题：精密度的3批试剂批间差设计方案有建议吗？

专家答复：建议由同一个操作人员在同一台仪器上按相同的测量程序进行检测，每个批号试剂用配套校准品校准后，测量同一个质控品或临床样本。检测可不在同一时间，如环境对检测影响较大，建议3批试剂检测期间控制环境条件尽量保持一致。

17、咨询问题：一般法规中对精密度的要求如下，就是这个n≥20一般指的是什么意思呢，每天检测的每份样本要检测20次？还是需要不同的20个阴性样本、20个临界阳性样本、20个中阳样本？

专家答复：n≥20指的是检测20次或有20个测量结果；不是需要不同的20个阴性样本、20个临阳样本、20个中阳样本。待评价样本至少有3个水平：阴性样本、临阳样本、中阳样本，各只有1个，样本需足量满足精密度实验需求。

18、咨询问题：精密度中自由度和s倍数对应表中，怎么选择合适的s倍数和自由度？

专家答复：一般取95%的置信区间，有效自由度无穷大时，s的倍数正好是1.96。我们也可以通过查表得到：95%的置信区间，s倍数为2.009的时候，有效自由度为50。在实际工作中，我们不可能去做无穷多次，可以假设为s倍数为2时，对应的有效自由度为50。

19、咨询问题：精密度评价，重复性、中间精密度、再现性，三个都需要评估吗？按照EP05-A3的20×2×2模型进行评估，是否能满足指导原则的要求？

专家答复：指导原则要求应根据各测量条件对检测结果影响程度的分析，设计合理的精密度试验方案进行评价，包括重复性、实验室内精密度、实验室间精密度和批间（lot-to-lot）精密度。按照EP05-A3的20×2×2模型进行评估，每批两个结果（４０对）间的差异，就是该样品批内不精密度的具体表现，根据这个结果计算出来的不精密度是改变了重复性条件的批内不精密度。20×2×2模型考虑了体外诊断试剂在医学实验室使用过程中的分析批、时间等影响因素，归类为中间精密度的一种情况。

20、咨询问题：对于定性试剂的精密度测试实验怎么设计呢？

专家答复：参考《定性检测体外诊断试剂分析性能评估注册审查指导原则》。应根据各测量条件对检测结果影响程度的分析，设计合理的精密度试验方案进行评价，包括重复性、实验室内精密度、实验室间精密度和批间（lot-to-lot）精密度。应选择包括最低检出限水平、中强浓度水平、阴性的至少三个分析物浓度水平样本进行精密度研究。如适用，还应进行临界值水平的精密度研究。

本专家解答仅代表专家个人观点，不代表任何机构，不能替代相关法律法规，仅作参考用。

未完待续。