2022年11月17日，由中国医学装备协会应用评价分会主办，北京水木济衡生物技术有限公司承办的《体外诊断试剂研发全流程管理培训课》第三期分析性能评价课程正式开课，培训课程持续三天，邀请了多位行业资深专家授课，吸引了上百家企业参加。

       培训的最后一天，设置了讨论环节，多位专家就学员提出的问题进行了详细的解答，现将部分问题及专家回复整理如下。

01不同项目的医学决定水平都有哪些渠道和方式可以获得?

专家答复：

       医学决定水平（Medicine decide level，MDL）是临床医生在诊断和治疗疾病时应该掌握和使用的数据，它是不同于参考值的另一些限值，临床医生可以通过观察测定值是否高于或低于这些限值，可在疾病诊断中起排除或确认的作用，或对某些疾病进行分级或分类，或对预后作出估计，以提示医师在临床上应采取何种处理方式，如进一步进行某一方面的检查，或决定采取某种治疗措施等等。

       医学决定水平与参考值有区别。参考值来源于大量的健康人群中有关实验测定数据，并根据健康人群中不同年龄、性别分别进行统计分析，得到了绝大多数人群中数据的分布范围，并以此确定参考范围。而医学决定水平是来源于大量的临床患者数据的观察和积累，用于确定疾病的发生发展和变化情况，并针对这些情况对患者进行诊断和治疗。

       例如，血清白蛋白的参考范围为35～55g/L，可将它分为3个医学决定水平，第1级决定水平为20g/L，肝病患者白蛋白低于20g/L 时说明预后严重；第2级决定水平为35g/L，为检查所有低白蛋白的界限值；第3级决定水平为57g/L，稍高于参考范围上限，＞57g/L应考虑脱水的可能性。

       再例如，ALT的参考范围为5～40U/L，但其医学决定水平有3个，第1个决定水平是300U/L，＞300U/L，通常与急性肝细胞损伤有关，如病毒性肝炎、中毒性肝炎、肝性休克等，＜300U/L，往往是酒精性肝炎，其他如传染性单核细胞增多症、多肌炎等；第2个决定水平是60U/L，此值比参考值上限高50%左右，一般当ALT 测定值在40～60U/L之间时，并不能确定ALT的升高是否属于病理性改变，许多不很健康的肥胖者，其ALT 值就通常浮动在这范围之内，只有当ALT值>60U/L时，才可明确诊断为肝细胞损伤，所以它是一个确认值；ALT的第3个医学决定水平是20U/L，这是一个排除值，低于此值则可排除许多与ALT升高有关的疾病。

 医学决定水平的界定需要进行大量的临床观察和研究，是一项十分复杂的工作。目前，临床常用检验项目的医学决定水平都能从各种医学参考书籍、诊疗指南、专家共识查到。

       例如，《中国临床血脂检测指南》中对我国普通人群血脂水平分层标准如下：

02EP文件的获得途径，如何及时得知相关文件和法规是否更新?有没有专门分析学习EP文件的平台?

专家答复：

       EP文件可从CLSI官网（https://clsi.org/）上查询和购买。另外，国内发布的一些性能评价相关的标准、指导原则、参考书籍在基本原则上也与CLSI的EP文件一致，具有很强的参考价值。现对这些文件汇总如下：

03产品技术要求里面的准确度项目，是否使用正确度更为合适？现在很多行业标准写得都是准确度。

专家答复：

       准确度和正确度是两个不同的术语。测量正确度是评价均匀样品的一系列测量结果中系统测量误差的性能特征。正确度是一个定性概念，但测量偏倚可以被评估。评估偏倚需有可用于确定被测量参考量值的适当参考物质或参考测量程序。准确度是一个测得量值与被测量的真量值间的差异，这个测量误差包括由测量偏倚估计的系统测量误差分量和由标准差估计的随机测量误分量，准确度是正确度和精密度的组合。一个测量结果的不准确度可以用测量不确定度来表达（以前用总误差表达）。

       由于临床实验室检验工作特点，一般情况下我们只对每个样品只做1次就发出报告，因此，我们报告的结果不是均值，只是一个分析中的一个抽样值，因此考察方法或试剂的准确度非常重要。目前，在定量测定试剂盒的行业标准制修订过程中，大多数情况下用了“准确度”这一指标，试验方法如下：

04常规定量免疫检测产品对于指尖血(非抗凝)的性能评价方法有何建议呢？因为它很快就凝固了，操作起来很困难

专家答复：

       常规定量免疫检测产品如果还适用于指尖血这一样本类型，应采用合理方法评价这一样本类型的适用性。对具有可比性的样本类型，可选择具有统计学意义数量的样本进行样本一致性的同源比对研究；对于不具有可比性的样本类型，应对每种样本类型分别进行分析性能评估。

       以自测用血糖监测系统举例，其适用的样本类型如果是指尖、手掌、上臂等部位的毛细管全血，如不同采样部位的毛细血管全血样本具有可比性，应选择具有统计学意义数量的样本（手掌、上臂）与指尖血样本进行一致性的同源比对研究，明确分析结果之间是否存在显著差异，存在的差异是否可被接受。另外，如在分析性能中采用静脉全血进行替代性研究，应说明采用替代样本的原因并进行不同采样部位全血与静脉全血的等效性研究。

05产品研发过程中，是否可以使用获得CE认证但未获国内注册证的已上市产品，对使用的样本进行性质及量值的确定？如使用CE认证产品（国内未获批）对收集的临床样本进行检测并确认浓度后，进行最低检测限的研究。

专家答复：

       研发阶段，作为对照方法的试剂应为成熟可靠的试剂，一般应当采用已上市试剂进行研究。如确无已上市试剂，可以采用未上市但已定型的试剂进行研究。

06病原菌抗体检测试剂盒，国内无上市同类定量产品，在最低检出限、阳性判断值等性能研究中，是否可采用CE认证的，选用针对不同抗原的抗体检测试剂盒对样本进行定值。

专家答复：

       对于病原菌抗体检测试剂的性能评价，所用到的阳性样本、阴性样本，应有明确的临床诊断“金标准”方法或其他成熟方法对这些样本进行鉴定，或者这些样本应有准确临床诊断信息。

07对于国家标准品的准确度检验，如果国家标准品说明书中的要求和产品适用的推荐性标准（YY/T）不一致，是否应该优先参考国家标准品说明书中的要求？

专家答复：

        一般不会出现国家标准品说明书与行业标准不一致的情况。如果确实出现不一致的情况，优先参考国家标准品说明书中的要求，并及时与标委会联系反馈。

08基于microRNA的测序检测，没有公认的金标准，现有标准物质不能监测整个试验过程（不能覆盖提取实验，只能以RNA对测序实验进行参考），如何判定其定量性能？

专家答复：

       这种情况下，企业应先建立自己的全过程监控标准，确定自己的定量性能。过程中注意：

       1.提取效率验证一般采用临床样本进行，可以通过梯度稀释及对照等方式，计算提取效率；

       2.microRNA在外周血中主要存在于外泌体中，外泌体为细胞膜结构，一般认为对提取过程的影响较小，且现在无人工模拟外泌体的方法，一般均将microRNA直接混入外周血来制备企业参考品。

09当样本类型为血清、血浆、静脉全血与指尖全血时，指尖全血是否需要单独进行分析性能评估，如精密度，分析灵敏度等

专家答复：

同问题4的答复。

10当企业无法获得大量正常人血清的情况下，可以用其他的血清做实验吗？

专家答复：

       体外诊断试剂用于对人体样本(血液、体液、细胞、组织样本等)进行检测的，因此在产品研发阶段分析性能评价、企业参考品制备、产品校准品和质控品制备生产、阳性对照品和阴性对照品制备生产、国家标准物质研制等过程大量使用临床样本。这些临床样本，大部分不是特意采集的患者样本，是实验室废弃样本，不会对患者产生风险，不干预患者诊疗，也不会造成人类遗传信息泄露。但是在目前国家《献血法》、《医疗废弃物管理条例》、《人类遗传资源管理条例》、《人类遗传资源采集、收集、买卖、出口、出境审批行政许可事项服务指南》、《实验室生物安全通用要求》等法规规定下，实验室出于生物安全、患者知情等因素，一般不愿意提供给企业，血源性原料获得存在非常大的困难。

       为了振兴我国的生物医药产业和医疗器械产业，确保生产、研发对血源性原料的供给，为此相关IVD行业协会多次建议国家出台相关法规，推动血源合法化。

       本专家解答仅代表专家个人观点，不代表任何机构，不能替代相关法律法规，仅作参考用。

       未完待续。